- English
- 简体中文
- Esperanto
- Afrikaans
- Català
- שפה עברית
- Cymraeg
- Galego
- 繁体中文
- Latviešu
- icelandic
- ייִדיש
- беларускі
- Hrvatski
- Kreyòl ayisyen
- Shqiptar
- Malti
- lugha ya Kiswahili
- አማርኛ
- Bosanski
- Frysk
- ភាសាខ្មែរ
- ქართული
- ગુજરાતી
- Hausa
- Кыргыз тили
- ಕನ್ನಡ
- Corsa
- Kurdî
- മലയാളം
- Maori
- Монгол хэл
- Hmong
- IsiXhosa
- Zulu
- Punjabi
- پښتو
- Chichewa
- Samoa
- Sesotho
- සිංහල
- Gàidhlig
- Cebuano
- Somali
- Тоҷикӣ
- O'zbek
- Hawaiian
- سنڌي
- Shinra
- Հայերեն
- Igbo
- Sundanese
- Lëtzebuergesch
- Malagasy
- Yoruba
- Español
- Português
- русский
- Français
- 日本語
- Deutsch
- tiếng Việt
- Italiano
- Nederlands
- ภาษาไทย
- Polski
- 한국어
- Svenska
- magyar
- Malay
- বাংলা ভাষার
- Dansk
- Suomi
- हिन्दी
- Pilipino
- Türkçe
- Gaeilge
- العربية
- Indonesia
- Norsk
- تمل
- český
- ελληνικά
- український
- Javanese
- فارسی
- தமிழ்
- తెలుగు
- नेपाली
- Burmese
- български
- ລາວ
- Latine
- Қазақша
- Euskal
- Azərbaycan
- Slovenský jazyk
- Македонски
- Lietuvos
- Eesti Keel
- Română
- Slovenski
- मराठी
- Srpski језик
Чаро фарҳанги ҳуҷайра аввал ҳуҷайраҳои сурхи хунро лиз мекунад?
2022-12-23
Муқаддимаи асосӣ
Лизати эритроситӣ яке аз усулҳои соддатарин ва осонтарини хориҷ кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун, яъне тақсим кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун бо лизат мебошад, ки ҳуҷайраҳои ядроиро вайрон намекунад ва ҳуҷайраҳои сурхи хунро комилан хориҷ карда метавонад. Ҷудокунии лизат як усули сабуки бартараф кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун аст, ки асосан барои ҷудо кардан ва тоза кардани ҳуҷайраҳои бофтаи тавассути ҳозимаи ферментҳо парокандашуда, ҷудо ва тоза кардани лимфоситҳо ва хориҷ кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун дар таҷрибаҳои сафедаи бофта ва нуклеин истифода мешавад. истихроҷи кислота. Ҳуҷайраҳои бофтаи аз лизати ҳуҷайраҳои сурхи хун ба даст овардашуда ҳуҷайраҳои сурхи хун надоранд ва минбаъд метавонанд барои фарҳанги ибтидоӣ, синтези ҳуҷайра, цитометрияи ҷараён, ҷудо ва истихроҷи кислотаи нуклеин ва сафеда ва ғайра истифода шаванд.
Дастурҳо барои истифода
Намунаи ҳуҷайраҳои бофта
1. Бофтаҳои тару тоза тавассути гадуди зери меъда/фермент ё коллагеназа ҳазм карда шуда, ба суспензияи якҳуҷайра пароканда карда шуданд ва супернатант тавассути центрифуга партофта шуд.
2. Лизати ELS-ро аз яхдон дар ҳарорати 4 гиред, лизати ELS-ро ба преципитати ҳуҷайра дар таносуби 1:3-5 илова кунед (ба 1мл ҳуҷайраи фишурдашуда 3-5мл лизат илова кунед), мулоим бод кунед ва омехта кунед.
3. Дар 800-1000 чархзанӣ барои 5-8 дақиқа центрифуга кунед ва моеъи шаффофи сурхи болоиро партоед.
4. Қисмати боришот ҷамъоварӣ карда шуд ва бо маҳлули Хэнк ё маҳлули фарҳангии бе зардоб 2-3 маротиба центрифуга карда шуд.
5, агар крекинг пурра набошад/пурра бошад, қадамҳои 2 ва 3-ро такрор кардан мумкин аст.
6. Ҳуҷайраҳои суспензия барои таҷрибаҳои минбаъда; Агар РНК истихроҷ карда шавад, беҳтар аст, ки ин корро дар маҳлули аз Қадами 4 бо истифода аз оби DEPC омодашуда анҷом диҳед
Лизати эритроситӣ яке аз усулҳои соддатарин ва осонтарини хориҷ кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун, яъне тақсим кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун бо лизат мебошад, ки ҳуҷайраҳои ядроиро вайрон намекунад ва ҳуҷайраҳои сурхи хунро комилан хориҷ карда метавонад. Ҷудокунии лизат як усули сабуки бартараф кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун аст, ки асосан барои ҷудо кардан ва тоза кардани ҳуҷайраҳои бофтаи тавассути ҳозимаи ферментҳо парокандашуда, ҷудо ва тоза кардани лимфоситҳо ва хориҷ кардани ҳуҷайраҳои сурхи хун дар таҷрибаҳои сафедаи бофта ва нуклеин истифода мешавад. истихроҷи кислота. Ҳуҷайраҳои бофтаи аз лизати ҳуҷайраҳои сурхи хун ба даст овардашуда ҳуҷайраҳои сурхи хун надоранд ва минбаъд метавонанд барои фарҳанги ибтидоӣ, синтези ҳуҷайра, цитометрияи ҷараён, ҷудо ва истихроҷи кислотаи нуклеин ва сафеда ва ғайра истифода шаванд.
Дастурҳо барои истифода
Намунаи ҳуҷайраҳои бофта
1. Бофтаҳои тару тоза тавассути гадуди зери меъда/фермент ё коллагеназа ҳазм карда шуда, ба суспензияи якҳуҷайра пароканда карда шуданд ва супернатант тавассути центрифуга партофта шуд.
2. Лизати ELS-ро аз яхдон дар ҳарорати 4 гиред, лизати ELS-ро ба преципитати ҳуҷайра дар таносуби 1:3-5 илова кунед (ба 1мл ҳуҷайраи фишурдашуда 3-5мл лизат илова кунед), мулоим бод кунед ва омехта кунед.
3. Дар 800-1000 чархзанӣ барои 5-8 дақиқа центрифуга кунед ва моеъи шаффофи сурхи болоиро партоед.
4. Қисмати боришот ҷамъоварӣ карда шуд ва бо маҳлули Хэнк ё маҳлули фарҳангии бе зардоб 2-3 маротиба центрифуга карда шуд.
5, агар крекинг пурра набошад/пурра бошад, қадамҳои 2 ва 3-ро такрор кардан мумкин аст.
6. Ҳуҷайраҳои суспензия барои таҷрибаҳои минбаъда; Агар РНК истихроҷ карда шавад, беҳтар аст, ки ин корро дар маҳлули аз Қадами 4 бо истифода аз оби DEPC омодашуда анҷом диҳед
Ҳуҷайраҳои сурхи хун давраи ҳаёти хеле кӯтоҳ доранд, ҳамагӣ 120 рӯз, аммо онҳо хунро хеле зуд тавлид мекунанд ва дар ин ҳолат онҳо махсусан қобилияти тақсими ҳуҷайра доранд ва онҳо аз ҳама ҳуҷайраҳои зуд тақсимшаванда мебошанд, бинобар ин ин ҳуҷайра хеле арзишманд аст, бинобар ин барои маданияти ҳуҷайра хеле муфид аст. Ин хеле содда аст, дар он ягон органелл нест, танҳо мембранаҳои ҳуҷайра ва сафедаҳо.
